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二氧化碳培養(yǎng)箱的應(yīng)用及維護

更新時間:2025-01-04      瀏覽次數(shù):3077

二氧化碳培養(yǎng)箱的應(yīng)用及維護

    說到二氧化碳培養(yǎng)箱大家可能對它的名字比較熟知,但對它的真正了解可能不是太多,前面我們也提到過它的兩種常見的工作形式,今天我們主要說說它的應(yīng)用范圍及一些維護技巧。

二氧化碳培養(yǎng)箱主要是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。因為它這樣*的特性使它廣泛應(yīng)用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見于細胞動力學(xué)研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。其原理是應(yīng)用人工的方法在培養(yǎng)箱內(nèi)造成微生物和細胞、細菌、病毒生長繁殖的人工環(huán)境,如控制一定的溫度、濕度、氣體等,主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。

正因為它是培養(yǎng)細胞和細菌的設(shè)備,那么對于細胞來說,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)。

如病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

支原體:支原體污染后,因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑制細胞生長等,往往被大多數(shù)實驗者忽視。

細菌:細菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,應(yīng)迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。

     真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。

     所以對于二氧化碳培養(yǎng)箱而言,其培養(yǎng)細胞的本身對細胞、細菌的污染防治也是尤為重要的,否則我們的實驗將會產(chǎn)生適得其反的效果。



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